<sup id="umeow"><wbr id="umeow"></wbr></sup>
<sup id="umeow"><wbr id="umeow"></wbr></sup><object id="umeow"></object>
<sup id="umeow"><wbr id="umeow"></wbr></sup>
<sup id="umeow"></sup>
<tt id="umeow"></tt>
<sup id="umeow"><wbr id="umeow"></wbr></sup>
<sup id="umeow"></sup>
<acronym id="umeow"><noscript id="umeow"></noscript></acronym>
<sup id="umeow"><option id="umeow"></option></sup>
<object id="umeow"></object><object id="umeow"></object>
熱門(mén)搜索:掃描電鏡,電子顯微鏡,細胞成像分析
技術(shù)文章 / article 您的位置:網(wǎng)站首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 掃描電鏡制樣方法|5種常用的生物樣品干燥方法

掃描電鏡制樣方法|5種常用的生物樣品干燥方法

發(fā)布時(shí)間: 2024-06-12  點(diǎn)擊次數: 603次

掃描電鏡制樣方法|5種常用的生物樣品干燥方法

掃描電鏡在觀(guān)察生物樣品時(shí),具有以下特點(diǎn):多角度觀(guān)察樣品的表面結構;不需要將樣品切成薄片;景深大、圖像立體感強;放大倍數從幾十倍到幾十萬(wàn)倍連續可調;在觀(guān)察形貌的同時(shí)可以對微區的成分進(jìn)行定量和定性分析。而能否獲得真實(shí)、清晰、理想的掃描電鏡觀(guān)察結果,樣品的制備過(guò)程是關(guān)鍵。

 

生物樣品含水直接觀(guān)察,會(huì )對掃描電鏡造成以下影響:

 

1.  樣品蒸發(fā)的水蒸氣遭遇高能電子束,會(huì )被電離而放電,引起束流大幅度波動(dòng),使圖像模糊,或者根本不能成像;

2.  大多數含水樣品在高真空中容易發(fā)生形態(tài)損傷,表面皺縮、變形; 

3.  樣品揮發(fā)會(huì )造成鏡頭、光闌等的污染; 

4.  燈絲會(huì )被上升水蒸氣氧化而變質(zhì)。

 

生物樣品的含水量高,二次電子產(chǎn)率低,導電性差,對熱,電子束敏感,僅有少數樣品如毛發(fā)、牙齒以及含水量極低的昆蟲(chóng)等可以直接噴鍍觀(guān)察,絕大多數的生物樣品均要求經(jīng)過(guò)干燥處理才能鍍金觀(guān)察。

 

干燥是掃描電鏡生物樣品制備中的關(guān)鍵環(huán)節,如果處理不好,會(huì )直接影響到觀(guān)察的清晰度與準確度。要想制備出好的掃描電鏡生物樣品,需要在干燥過(guò)程中盡可能減少由于水分蒸發(fā)而引起的樣品表面形貌的形變,且必須確保干燥。大多數動(dòng)植物容易發(fā)生明顯的塌陷和變形。因此,需要針對不同的生物樣品來(lái)選擇合適的干燥方法。

 

掃描電鏡生物樣品制備常用干燥方法

 

01  自然干燥法

 

自然干燥法是指樣品中的水分在大氣中自然蒸發(fā),或樣品經(jīng)脫水處理后脫水劑自然揮發(fā)而干燥的方法。

 

對干種子、果殼、某些干花粉、昆蟲(chóng)標本等來(lái)說(shuō),自然干燥法是一個(gè)簡(jiǎn)易實(shí)用有效的方法,雖然在自然干燥過(guò)程中,樣品體積有所收縮,但卻保留了樣品的基本形態(tài)。適用于外表堅硬的樣品,如外表有殼的昆蟲(chóng),木材等。

 

1.png

自然風(fēng)干——飛納掃描電鏡直接觀(guān)察螨蟲(chóng)

 

02  烘干干燥法 

 

烘干干燥法是將要研究的樣品用烘干箱烘干,一般溫度控制在 80℃ 以下,烘干程度以含水量在 5% 以下為好。此方法的干燥速度較快,但水分蒸發(fā)時(shí)可能造成樣品變形或斷裂。適用于不易變形且耐熱的樣品,比如淀粉粒、孢子粉等。

 

2.png

烘干的花粉噴金后直接可以用二次電子觀(guān)察

 

03  臨界點(diǎn)干燥法

 

臨界點(diǎn)干燥法是利用物質(zhì)在臨界狀態(tài)下,液體和氣體的密度相等,氣液界面消失,液體的表面張力系數為零。臨界點(diǎn)干燥法之所以一直被視為制作生物醫學(xué)掃描樣品可靠的干燥方法,是因為此法能消除液體表面張力的作用,干燥出的樣品能較大程度地保存其自然形態(tài)。

 

04  冷凍干燥法

 

冷凍干燥法是將含水樣品放入低溫環(huán)境中冷凍,或使用溶劑將樣品中的水逐級替換后冷凍,然后抽真空升華。它是利用低溫和真空,使樣品中的水分或溶劑直接升華,以達到干燥樣品的目的。冷凍干燥過(guò)程不經(jīng)過(guò)液相階段,因而避免了氣相和液相之間表面張力對樣品的損傷。

 

05  真空干燥法

 

真空干燥法指的是將經(jīng)脫水(多用梯度脫水)的樣品置于真空容器中進(jìn)行干燥的方法。真空干燥法選用高熔點(diǎn)的有機溶劑(叔丁醇、乙腈、六甲基二硅胺烷、正丁醇等)作升華介質(zhì),既保留了冷凍干燥法的優(yōu)點(diǎn),又不用對樣品進(jìn)行冷凍處理,無(wú)冷凍損傷,且操作簡(jiǎn)單。適用于所有生物樣品,特別是細菌、細胞等微小樣品。

 

3.png

經(jīng)過(guò)梯度脫水真空干燥的桿菌可以輕松獲得高倍圖像

 

小結

 

干燥方法在不斷改進(jìn),但還是只能把由干燥引起的樣品變形控制在一定的范圍內。上述 5 種干燥方法各有優(yōu)缺點(diǎn),且各有適用的生物樣品種類(lèi)。我們在選擇生物樣品干燥的方法時(shí),盡量選擇能保持樣品表面真實(shí)結構的方法,在保證掃描電鏡狀態(tài)下,盡量還原樣品表面細節。

 

對于生物樣品,飛納電鏡低真空模式可以直接觀(guān)察一些生物樣品,如新鮮植物葉片,昆蟲(chóng)等。觀(guān)察葉子氣孔,高亮度的 CeB6 燈絲可以在低曝光時(shí)間下快速拍照,獲得高質(zhì)量圖像,避免了長(cháng)時(shí)間曝光導致氣孔關(guān)閉以及長(cháng)時(shí)間抽真空導致葉片失水收縮。

 

4.png

飛納電鏡低真空下觀(guān)察葉子氣孔

 

此外,飛納電鏡的專(zhuān)用控溫樣品杯可以控制樣品溫度,進(jìn)而改變樣品周?chē)臐穸?,最大限度地降低電子束和真空度對樣品的損壞。適用于一些含水較高的水凝膠,蛋白,藻類(lèi)等樣品,在冷凍狀態(tài)下,不脫水,背散射直接觀(guān)察,可以保持樣品的原始形貌結構。

 

5.png

冷凍的水凝膠,觀(guān)察到其大范圍內,短程有序,長(cháng)程無(wú)序


 

  • 聯(lián)系電話(huà)電話(huà)4008578882
  • 傳真傳真
  • 郵箱郵箱cici.yang@phenom-china.com
  • 地址公司地址上海市閔行區虹橋鎮申濱路88號上海虹橋麗寶廣場(chǎng)T5,705室
© 2024 版權所有:復納科學(xué)儀器(上海)有限公司   備案號:滬ICP備12015467號-5   sitemap.xml   管理登陸   技術(shù)支持:制藥網(wǎng)       
  • 公眾號二維碼

聯(lián)


<sup id="umeow"><wbr id="umeow"></wbr></sup>
<sup id="umeow"><wbr id="umeow"></wbr></sup><object id="umeow"></object>
<sup id="umeow"><wbr id="umeow"></wbr></sup>
<sup id="umeow"></sup>
<tt id="umeow"></tt>
<sup id="umeow"><wbr id="umeow"></wbr></sup>
<sup id="umeow"></sup>
<acronym id="umeow"><noscript id="umeow"></noscript></acronym>
<sup id="umeow"><option id="umeow"></option></sup>
<object id="umeow"></object><object id="umeow"></object>